Vinay Khanna et Indira Bairy
Contexte et objectif : En général, les méthodes moléculaires, telles que la détection de l'ARN viral ou de l'ADN proviral, sont les méthodes les plus sensibles pour le diagnostic précoce du VIH de type 1. Ces méthodes impliquent des technologies complexes et coûteuses et sont donc restées largement indisponibles dans les milieux pauvres en ressources du monde en développement. Dans cette étude, nous avons essayé d'utiliser un nouveau test immunologique du VIH1 moins sensible en utilisant la méthode d'avidité en conjonction avec le test immunoenzymatique sensible pour différencier les personnes atteintes d'une infection récente et de longue date par le VIH-1. Méthodes : Cette étude a été menée dans un centre de soins tertiaires dans le sud de l'Inde. Des échantillons de sérum consécutifs (n = 261) ont été obtenus auprès de patients séropositifs au VIH âgés de plus de 15 ans. Un consentement éclairé écrit, des détails épidémiologiques, cliniques et de laboratoire ont été obtenus auprès de tous les participants. Tous les cas d'infection par le VIH-1 ont été testés avec un ELISA standard et confirmés par un test de Western blot. Ces échantillons ont ensuite été testés par la méthode de l'indice d'avidité et des études d'affinité pour distinguer les patients atteints d'une infection récente du VIH-1 établi. Français L'indice d'avidité ≤ 0,9 a été pris comme valeur seuil pour une infection récente par le VIH avec une durée du VIH inférieure à 6 mois. Résultats : Sur 261 patients, 26 patients ont été trouvés avec une valeur de test d'avidité inférieure ou égale à 0,9 et ont été classés comme séroconvertisseurs récents avec des anticorps apparus dans le sérum pendant ≤ 6 mois et 235 patients avec une valeur d'avidité > 0,9 ont été placés comme cas à long terme avec des anticorps en circulation pendant > 6 mois de durée. Sur 26 cas d'infection récente, un cas a été classé à tort comme récemment infecté en utilisant la méthode d'immuno-essai d'avidité alors que les antécédents cliniques suggéraient une infection à long terme. Conclusions : Le test immunologique de l'indice d'avidité a été développé pour des caractéristiques de performance faciles, peu coûteux, permettant de gagner du temps et ne nécessitant pas d'exigences de laboratoire sophistiquées. Cette technique peut également être réalisée sur le terrain pour identifier les infections récentes, bien qu'il existe des risques d'erreur de classification chez les personnes infectées de longue date. L'identification des infections récentes basée sur la combinaison d'autres méthodes nécessite des recherches plus approfondies pour réduire les erreurs de classification et pour déterminer l'incidence réelle du VIH au plus tôt. Un immuno-essai est un test biochimique qui quantifie la proximité ou le regroupement d'une macromolécule ou d'une petite particule dans une solution à l'aide d'un agent antagoniste (la plupart du temps) ou d'un antigène (parfois). L'atome identifié par l'immuno-essai est souvent appelé "analyte" et est la plupart du temps une protéine, bien qu'il puisse s'agir de différents types de particules, de tailles et de types différents, à condition que les bons anticorps ayant les propriétés adéquates pour la mesure soient créés. Les analytes dans les fluides organiques, par exemple le sérum ou l'urine, sont souvent estimés à l'aide d'immuno-essais à des fins cliniques et d'enquête. Les immuno-essais sont disponibles dans différentes organisations et variétés.Les immuno-essais peuvent être exécutés de différentes manières, les réactifs étant ajoutés et éliminés ou isolés à différents points du test. Les tests en plusieurs étapes sont souvent appelés immuno-essais de partition ou immuno-essais hétérogènes. Certains immuno-essais peuvent être effectués simplement en mélangeant les réactifs et le test et en effectuant une estimation physique. De telles mesures sont appelées immuno-essais homogènes, ou moins communément immuno-essais sans séparation. L'utilisation d'un calibrateur est souvent utilisée dans les immuno-essais. Les calibrateurs sont des dispositifs connus pour contenir l'analyte auquel on fait référence, et la convergence de cet analyte est généralement connue. L'examen de la réaction d'une mesure à un échantillon réel par rapport à la réaction du test créée par les calibrateurs permet de déchiffrer la qualité du signal en ce qui concerne la proximité ou le regroupement de l'analyte dans l'échantillon. Les immuno-essais dépendent de la capacité d'un agent neutralisant à détecter et à lier une macromolécule particulière dans ce qui peut être un mélange déroutant de macromolécules. En immunologie, la macromolécule spécifique limitée par un neutralisant est appelée antigène et la région d'un antigène à laquelle l'agent neutralisant se lie est appelée épitope. Parfois, un immuno-essai peut utiliser un antigène pour déterminer la proximité d'anticorps, qui perçoivent cet antigène, dans une réponse. En fin de compte, dans certains immuno-essais, l'analyte peut être un neutralisant plutôt qu'un antigène. Malgré l'identité d'un agent neutralisant avec son antigène, l'autre élément clé de tous les immuno-essais est la capacité de fournir un signal quantifiable en tant qu'autorité. La plupart des immuno-essais, mais pas tous, consistent à lier synthétiquement des anticorps ou des antigènes à un nom perceptible. Il existe un grand nombre de marqueurs dans les immuno-essais actuels, et ils prennent en compte la reconnaissance par différentes méthodes. De nombreuses marques sont perceptibles dans la mesure où elles émettent un rayonnement, produisent un changement de couleur dans une solution, deviennent fluorescentes sous la lumière ou peuvent être incitées à émettre de la lumière. Les immuno-essais peuvent être exécutés selon différentes configurations. En général, un immuno-essai peut être classé dans l'une des trois classifications en fonction de la manière dont il est exécuté. Immuno-essais sérieux et homogènes : Dans un immuno-essai sérieux et homogène, l'analyte non marqué d'un échantillon entre en compétition avec l'analyte désigné pour lier un immunisant. La quantité d'analyte désigné et non lié est ensuite estimée. En principe, plus il y a d'analyte dans l'échantillon, plus l'analyte désigné est extrait puis évalué ; par conséquent, la quantité d'analyte marqué et non lié est relative à la quantité d'analyte dans l'échantillon. Les immuno-essais non compétitifs à deux sites comprennent généralement un analyte « pris en sandwich » entre deux anticorps. Les ELISA sont souvent exécutés dans cette configuration. Immuno-essais sérieux et hétérogènes : Comme dans un immuno-essai sérieux et homogène,L'analyte non marqué dans un exemple entre en compétition avec l'analyte marqué pour lier un agent antagoniste. Dans les tests hétérogènes, l'analyte non lié nommé est isolé ou éliminé par lavage, et l'analyte lié nommé restant est évalué. Dosages immunologiques non compétitifs à un seul site : L'analyte obscur dans l'exemple se lie aux anticorps marqués. Les anticorps marqués non liés sont éliminés par lavage, et les anticorps liés nommés sont évalués. La force du signal est directement relative à la mesure de l'analyte obscur.
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