Abstrait

Développement et validation d'un test immuno-enzymatique combiné sérum séché/tache de sang pour l'analyse des anticorps anti-protéines citrullinées : une nouvelle plateforme de biomarqueurs de la polyarthrite rhumatoïde

Gary W. Caldwell, Wensheng Lang, Sarah Lamberth, Mark Rigby, Yong-Qing Lin

L'objectif de la présente étude était de combiner les techniques de taches de sérum séché (DSS) et de sang séché (DBS) avec la détection par dosage immuno- enzymatique (ELISA) pour l'évaluation des anticorps anti-peptides et protéines citrullinés (ACPA) chez les patients atteints de polyarthrite rhumatoïde (PR). Deux nouveaux protocoles analytiques DSS-ELISA-ACPA et DBS-ELISA-ACPA ont été développés et validés par comparaison à un protocole ELISA-ACPA sérique établi. Des échantillons de sérum provenant de patients atteints de PR (n=24) et d'adultes sains (n=5) ont été testés. Les performances du test dans les trois protocoles étaient comparables sur la plage de concentrations d'ACPA de 20 à 1000 U/mL. La précision intra-essai et inter-essai (%CV) des données brutes de densité optique (DO) variait de 0,8 à 4,5 % et de 13,7 à 27,3 % pour la plateforme ELISA-ACPA (période de 10 mois), de 5,6 à 15,3 % et de 31,0 à 61,7 % pour la plateforme DSS-ELISA-ACPA (période de 10 mois) et de 7,0 à 21,2 % et de 24,3 à 39,3 % pour la plateforme DBS-ELISA-ACPA (période de 2 mois), respectivement. Les données brutes de DO ont été ajustées à l'aide d'une technique de courbe logistique symétrique à quatre paramètres (4PL). Français La précision inter-essais (%CV) et l'exactitude (%Récupération) des normes d'étalonnage variaient respectivement de 0,2 à 12,5 % et de 85 à 113 % pour la plateforme ELISA-ACPA, de 1 à 32 % et de 77 à 106 % pour la plateforme DSS-ELISA-ACPA et de 1 à 19 % et de 95 à 105 % pour la plateforme DBS-ELISA-ACPA. La corrélation entre les plateformes ELISA-ACPA et DSS-ELISA-ACPA pour 24 échantillons de sérum de PR et 5 échantillons de sérum de contrôle sain était élevée (r = 0,9873, p < 0,0001). Les nouvelles plateformes DSS/DBS-ELISA-ACPA peuvent être une approche précise et économique pour évaluer la prévalence et la détection précoce de la PR dans les études de population à grande échelle.