Abstrait

Méthode de chromatographie liquide et spectrométrie de masse pour la détermination de l’acide alpha-cétoglutarique dans le plasma humain.

Gundoju Suresh, PE Thirugnanam et Atmakuru Ramesh

L'acide alpha-cétoglutarique (A-KG) est actuellement étudié comme agent prometteur destructeur de cellules cancéreuses et antidote au cyanure. Une méthode simple et spécifique de chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS/MS) a été développée pour la détermination quantitative de l'A-KG dans le plasma humain. La dérivatisation de l'A-KG a été réalisée en utilisant du N-méthyl imidazole en présence d'anhydrate trifluoroacétique. Plusieurs paramètres, qui affectent le rendement de la réaction de dérivatisation, tels que la température et le temps de réaction, ont été optimisés. Un dérivé imidazole de l'A-KG a été extrait à l'aide d'éther méthyl-tertiobutylique et quantifié en mode d'ionisation par jet d'électrons positifs (rapport masse/charge (m/z) : 197). La méthode a été entièrement validée à l'aide de paramètres tels que la spécificité, la linéarité, la limite de détection et de quantification, la précision, l'exactitude, la récupération, la robustesse et la robustesse. La linéarité a été démontrée sur la plage de concentrations de 100 à 2500 ng·mL-1 avec un coefficient de corrélation (R2) de 0,9991. Les limites de détection et de quantification se sont avérées être respectivement de 40 et 100 ng·mL-1. L'exactitude et la précision intra- et inter-journalières se situaient dans la limite acceptable (< 8 %). La robustesse et la robustesse ont été évaluées à l'aide du modèle expérimental Plackett-Burman.