Abstrait

Spectrométrie de masse 2017 : efficacité et stabilité de l'antivenin antiscorpion : dans différentes conditions de stockage - Elhag DE - Université UMST

 Elhag DE 

 Introduction Dans de nombreuses régions du monde, les morsures de scorpion constituent un véritable problème de santé publique en raison de l'incidence ou de la gravité des envenimations, ou pour ces deux raisons à la fois. De nombreux scorpions potentiellement dangereux habitent les pays sous-développés ou en développement et de nombreuses envenimations ne sont pas signalées. Officiellement, on estime qu'il y a 1,2 million de piqûres de scorpion par an dans le monde, entraînant 3250 décès (0,27 %). Le rapport annuel 2014 du National Poison Data System (NPDS) de l'American Association of Poison Control Centers a fait état de 16 440 mentions de cas d'envenimations par scorpion. Cependant, en raison de la sous-déclaration, il s'agit probablement d'une sous-estimation du nombre réel de piqûres. Les venins de scorpion contiennent de nombreux composants bioactifs. Plusieurs des peptides à longue chaîne se sont révélés responsables d'effets neurotoxiques. Ces toxines sont des polypeptides basiques d'un poids moléculaire d'environ 7000 kD, sans action enzymatique et dont il a été démontré qu'ils affectent la perméabilité ionique des cellules excitables. Ces préparations sont incluses dans la liste des médicaments essentiels de l'OMS et devraient faire partie de tout ensemble de soins de santé primaires en cas de morsures de scorpion. L'antivenin est produit en trayant le venin du scorpion souhaité, en injectant le venin traite à un cheval, un mouton, un lapin ou une chèvre pour stimuler le système immunitaire de l'animal. Il est aujourd'hui urgent de garantir la disponibilité d'antivenins sûrs, efficaces et abordables, en particulier pour les populations des pays en développement, et d'améliorer le contrôle réglementaire de la fabrication, de l'importation et de la vente des antivenins. Le venin de scorpion contient des peptides neurotoxiques qui interagissent avec les canaux ioniques, provoquant des dommages massifs au système nerveux. Grâce à cette interaction, le venin de scorpion peut provoquer une excitation des nerfs et des muscles, une sécrétion hormonale et des perturbations dans le contrôle de l'équilibre du sel et de l'eau et de la régulation de la pression artérielle. Français Les symptômes cliniques lors d'une envenimation indiquent une stimulation générale des systèmes nerveux autonome, somatique et périphérique. La gravité de l'intoxication du scorpion et le risque accru de mortalité, notamment chez l'enfant, sont principalement attribués à une pathologie cardiorespiratoire. Matériels et réactifs Essais chimiques Détermination du pH : Le pH des échantillons sélectionnés a été mesuré à l'aide d'un pH-mètre approprié étalonné juste avant utilisation par rapport à des solutions tampons standards (pH 4 et pH 7). L'obligation de l'OMS de produire un antivenin indique que le pH de l'antivenin doit être compris entre 6 et 7. Détermination du m-crésol : Préparation de la solution tampon pH 9 Solution A : 6,18 g d'acide borique et 7,45 g de chlorure de potassium (0,1 M) à dissoudre dans 1000 ml d'eau. Solution B : hydroxyde de sodium 0,1 N R. A 1000 ml de solution A, on a ajouté 400 ml de solution B, de la soude a été ajoutée progressivement au mélange jusqu'à atteindre le pH 9.Solution de ferricyanure de potassium Exactement 5 g de ferricyanure de potassium ont été lavés avec 3 ml d'eau puis dissous et dilués avec de l'eau jusqu'à 100 ml (cette préparation a été préparée immédiatement avant utilisation). Solution d'aminoantipyrine R : 100 mg d'aminoantipyrine ont été dissous dans 100 ml de solution tampon pH 9. Préparation de l'échantillon Deux groupes tests ont été préparés. Le premier groupe est constitué de six ampoules anti-venin qui ont été choisies au hasard dans le lot d'antivenins de scorpion conservés dans des conditions réelles (3 ± 2 °C). Le deuxième groupe, composé de six ampoules anti-sérum, a été soumis à des conditions accélérées (25 ± 3 °C, RH75%). 0,2 ml de chaque échantillon (contient jusqu'à 0,35 % de m-crésol) a été dilué dans 3,5 ml d'eau pour donner une concentration finale de (200 µg/ml). Procédure Au total, sept béchers ont été étiquetés pour être utilisés, le premier a été défini comme vierge. Six autres béchers de 0,5 ml contenant les échantillons préparés ont été ajoutés à chaque bécher. Ensuite, 5 ml d'aminoantipyrine et 5 ml de ferricyanure de potassium ont été ajoutés successivement à chaque bécher. Les échantillons d'essai préparés ont été laissés pendant 10 minutes à température ambiante, puis l'absorbance de chaque échantillon a été mesurée à 540 nm à l'aide d'un spectrophotomètre UV/vis. Préparation standard de m-crésol La solution mère de solution de M-crésol (250 µg/ml) a été préparée en pesant exactement 1 g de m-crésol et en le transférant dans une fiole jaugée de 1 litre et le volume a été ajusté au repère à l'aide d'eau distillée. Exactement 2,5 ml ont été prélevés et complétés à 10 ml. Une série de dilutions appropriées a été effectuée pour construire la courbe standard et les concentrations des échantillons ont été déterminées à partir de la courbe standard. Détermination de la teneur en protéines totales/détermination de la teneur en albumine : La solution d'antivenin a été diluée avec une solution de sucrose à 25 % dans un tampon phosphate 0,01 M, pH 7, jusqu'à obtenir une teneur en protéines de 10 mg/ml. Des échantillons de 10 µl de l'antivenin ont été appliqués sur les membranes de gel de polyacrylamide dans la chambre de séparation et soumis à une électrophorèse. Un échantillon d'albumine standard de 1 mg/ml a été analysé simultanément avec des échantillons de sérum d'antivenin. Le gel a ensuite été retiré de la chambre de séparation et placé dans la chambre de développement et le développement a été effectué à l'aide de la même machine selon la méthode programmée suivante. Les mobilités électrophorétiques de l'antivenin et de l'albumine ont été comparées après coloration au bleu de Coomassie. Résultats Test de pH : Les mesures de pH d'ampoules sélectionnées au hasard après avoir été soumises à deux conditions de stockage différentes (réelles et accélérées) ont montré que les valeurs étaient comparables et dans la plage acceptable indiquée pour l'antivenin produit. L'obligation de l'OMS de produire un antivenin stipule que le pH de l'antivenin doit être compris entre 6 et 7. Les mesures de la teneur en m-crésol des ampoules ont été préalablement stockées dans des conditions de stockage appropriées (réelles, 3 ± 2ºC) et dans des conditions accélérées (25 ± 3ºC, RH75%).ont montré qu'il y avait un changement mineur dans la concentration de m-crésol, mais ce changement n'était ni significatif ni en dehors de la plage des limites acceptables indiquées sur la brochure de l'ampoule. La mesure de la teneur en protéines de l'antivenin polyvalent de scorpion obtenu au hasard à partir du lot et maintenu dans les deux conditions de stockage sélectionnées, condition de stockage en temps réel (3 ± 2ºC) et condition de stockage accéléré (25 ± 3ºC, HR75%). a montré que la teneur en protéines dans les deux classes d'échantillons était comparable. Les directives de l'OMS stipulent que la concentration totale de protéines dans les antivenins ne doit pas dépasser de préférence 10 g/dl, à moins qu'une teneur en protéines plus élevée ne soit justifiée et autorisée par l'autorité compétente. Conclusion Le présent travail a suggéré que le maintien de l'antivenin à la température et à l'humidité spécifiées et lorsqu'il est exposé à la lumière pendant une période plus longue n'affecte pas l'antivenin en termes de stérilité ou d'efficacité.

Avertissement: Ce résumé a été traduit à l'aide d'outils d'intelligence artificielle et n'a pas encore été examiné ni vérifié

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