Abstrait

Études de la cinétique enzymatique de la nucléoside diphosphate kinase dans les érythrocytes humains et distribution de fréquence chez les sujets sains et les receveurs de greffes dans la population chinoise Han

Rufei Shen, Chunxiao Yang, Xiaomei Luo, Tingyu Yang, Jiali Zhou, Yani Liu, Shaojun Shi*

La nucléoside diphosphate kinase (NDPK), en tant que protéine de ménage, intervient dans divers processus moléculaires, notamment la transduction du signal, le métabolisme énergétique et médicamenteux. L'objectif principal était d'étudier la cinétique de la NDPK dans les érythrocytes humains et de surveiller la distribution de fréquence des niveaux d'activité de la NDPK chez des sujets sains chinois et des receveurs de greffe. MÉTHODES : L'activité de la NDPK dans les érythrocytes a été détectée par une méthode validée de chromatogramme liquide haute performance à paires d'ions. Des études de cinétique de la NDPK ont été menées systématiquement. Les niveaux d'activité de la NDPK ont été déterminés chez 500 sujets sains, 250 receveurs de greffe de rein et 250 receveurs de greffe de foie dans la population chinoise Han. RÉSULTATS : Des études de stabilité thermique et de pH ont indiqué que la NDPK était relativement stable à une température de 30 à 45 ºC et à un pH de 6,0 à 9,0. Dans l'étude de dépendance au substrat, la constante apparente de Michaelis-Menten (Km) et la vitesse maximale de la réaction enzymatique (Vmax) ont augmenté avec la concentration de substrats. Français Pendant ce temps, dans l'étude d'inhibition du produit, avec l'augmentation de la concentration de dATP, le Vmax de dADP a diminué avec Km constant et Km de dGTP a augmenté avec Vmax constant. Les niveaux d'activité NDPK ont révélé une variabilité de 7 fois et n'étaient pas normalement distribués dans tous les groupes. Les niveaux d'activité NDPK étaient significativement (P < 0,05) plus élevés dans le groupe de transplantation que dans le groupe sain. De plus, des niveaux d'activité NDPK beaucoup plus élevés ont été observés (P < 0,001) chez les receveurs de transplantation hépatique par rapport aux cas de transplantation rénale. CONCLUSIONS : Les études de cinétique NDPK ont indiqué une dépendance au substrat de NDPK et un mécanisme de « ping-pong » pour l'inhibition de la production. Des distributions d'asymétrie des niveaux d'activité NDPK ont été observées dans la population étudiée. Les receveurs de transplantation ont montré des niveaux d'activité NDPK plus élevés par rapport aux sujets sains.