Abstrait

Isolement efficace et analyse fonctionnelle des mutants spontanés insensibles aux bactériophages de Streptococcus thermophilus

Chengjie Ma, Jinzhong Lin, Guangyu Gong, Zhenmin Liu, Zhengjun Chen, Aimin Ma

L'utilisation de souches résistantes aux bactériophages et possédant des propriétés technologiques satisfaisantes est essentielle pour prévenir les infections par les phages dans les processus de fermentation industrielle. Nous décrivons ici une méthode améliorée pour l'isolement de mutants spontanés insensibles aux bactériophages (BIM) de Streptococcus thermophilus. La concentration de grands volumes de cultures secondaires de S. thermophilus, leur sous-culture dans du lait écrémé avec des titres élevés de bactériophages et leur inoculation avec le phénotype acidifiant rapide du lait sur plusieurs passages étaient essentielles pour augmenter la probabilité d'obtenir des mutants, améliorer l'efficacité de l'isolement et maintenir les performances technologiques. Nous avons obtenu de grandes quantités de BIM après chaque cycle de criblage, avec une efficacité d'isolement supérieure à 85 %. Nous avons analysé neuf BIM, et ceux-ci étaient tous similaires à leur souche mère S. thermophilus St1 en ce qui concerne la synérèse, la capacité de rétention d'eau et la viscosité apparente. Par rapport à la souche mère, sept des neuf variantes possédaient des activités acidifiantes équivalentes, les deux variantes restantes présentant d'excellentes performances d'acidification. Un ou deux nouveaux espaceurs provenant de phages correspondants ont été trouvés dans les neuf BIM, démontrant que le système CRISPR/Cas était responsable de la résistance aux phages de S. thermophilus.