Abstrait

Expression de la protéine de capside majeure du parvovirus caïnine par la levure (Pichia pastoris) et purification efficace à l'aide d'arginine en chromatographie d'affinité

Ying He, Qiumei Shi, Sumin Pan, Cairan Yang, Yanying Zhang et Xinhua Shao

Un test immunochromatographique (IC) a été développé pour la détection rapide du parvovirus canin en utilisant les anticorps monoclonaux (McAbs) contre le parvovirus canin (CPV-2). Pour préparer les McAbs, le gène codant la protéine VP2 du CPV-2a a été exprimé dans un vecteur d'expression de Pichia pastoris pPICZ-A. La VP2 recombinante avait une fonction antigénique similaire à la protéine de capside native, comme démontré par Western blot en utilisant un antisérum polyclonal CPV-2. Les McAbs contre le CPV-2 ont été produits en fusionnant la lignée cellulaire de myélome SP2/0 avec des cellules de rate de souris Balb/C immunisées avec la protéine VP2 recombinante purifiée. Par ELISA, il a été démontré que les McAbs reconnaissaient spécifiquement les épitopes VP2 du CPV-2 mais pas ceux d'autres virus canins tels que le virus de la maladie de Carré (CDV) ou l'adénovirus canin (CAV). Un test IC développé avec les McAbs s'est avéré adapté à la détection rapide du parvovirus canin. Des échantillons fécaux (120) de chiens suspectés d'infection par le CPV-2 ont été analysés à la fois par test d'hémagglutination (HA) et par test IC, et 52 et 53 échantillons se sont révélés positifs pour le CPV-2, respectivement. La comparaison entre les deux tests différents a révélé que le test IC est aussi sensible que le HA ; la sensibilité et la spécificité du test IC sont respectivement de 98,6 % et 98,1 %.