Abstrait

Construction d'un vecteur d'interférence ARN à haute efficacité et stable pour Penicillium sp.

Haizhao Xue, Yibo Hu, Xiaoran Fang, Guangshan Yao, Xin Song

L'interférence ARN (ARNi), qui peut réduire efficacement et spécifiquement l'expression des gènes, a montré un grand potentiel dans la recherche sur la fonction des gènes et la modification des gènes. Dans cette étude, un vecteur d'interférence ARN pHX-ARNi, qui porte une cassette de résistance à l'hygromycine et une unité transcriptionnelle pour l'expression de l'ARN en épingle à cheveux , a été construit. Un gène amy15A qui code l'amylase majeure dans une souche productrice de cellulase élevée, Penicillium oxalicum A11, a été ciblé par knock-down. Les résultats de SDS-PAGE et RT-qPCR ont montré que les niveaux de transcription et de sécrétion d'Amy15A étaient considérablement sous-régulés, ce qui implique que l'ARNi joue un rôle important dans la régulation de l'expression des gènes après la transcription. Tous les transformants résistants à l'hygromycine avec les constructions de silençage ont montré un degré élevé de silençage de l'expression d'amy15A. Compte tenu du conservatisme de la machinerie d'ARNi chez les champignons, le vecteur d'ARNi établi dans cette étude - pHX-ARNi pourrait être appliqué à d'autres champignons filamenteux.