Abstrait

Réplication et traduction des gènes du virus de l'hépatite B introduits par le sperme dans les cellules embryonnaires

Qiu-Ju Zhang, Ying Zhong, Ji-Hua Huang, Qing-Dong Xie, Xiao-Fang Tan, Chen-Yao Zhong, Lan Xu, Tian-Hua Huang

Objectif : Étant donné que le virus de l'hépatite B (VHB) peut infecter les spermatozoïdes humains et que les gènes du VHB introduits par les spermatozoïdes peuvent être transcrits dans les embryons en développement, nous avons cherché à confirmer la présence d'antigènes du VHB matures et à évaluer le mécanisme de réplication des gènes viraux dans les cellules embryonnaires. Méthodes : Les spermatozoïdes humains ont été transfectés avec les plasmides recombinants pIRES2-EGFP-HBs ou pIRES2-EGFP-HBc, puis utilisés pour féconder des ovules de hamster doré exempts de zona. Des embryons bicellulaires avec et sans fluorescence verte ont été prélevés pour la détection de l'ADN ou de la protéine du VHB par hybridation in situ en fluorescence (FISH), test d'immunofluorescence (IA) et test d'immuno-absorption enzymatique (ELISA). Résultats : 1. Des signaux FISH positifs pour l'ADN HBs et HBc ont été observés dans les noyaux des spermatozoïdes et dans les noyaux des embryons bicellulaires dans les échantillons d'essai, mais n'ont pas été détectés dans les témoins. 2. Des signaux IA positifs pour HBsAg ou HBcAg ont été détectés dans le cytoplasme des embryons à deux cellules dans les échantillons de test mais pas dans les témoins. 3. En utilisant ELISA, le niveau d'HBsAg dans un seul embryon à deux cellules était de 0,064 ng/ml. De même, HBcAg a été détecté dans le groupe expérimental de cinq embryons. Conclusion : Les gènes S ou C du VHB introduits par le sperme ont pu se répliquer de manière concomitante dans le génome de l'embryon hôte via un mode semi-conservateur de réplication de l'ADN et ont pu exprimer des protéines virales dans les cellules embryonnaires.